保证毛细管电泳仪有效分离的关键,使实验重复性达到应用要求

更新时间:2019-08-16      点击次数:1712
   保证毛细管电泳仪有效分离的关键,使实验重复性达到应用要求
  毛细管电泳仪的工作原理
  毛细管电泳仪采用并行毛细管电泳(CE)与荧光检测技术相结合,能够对DNA和RNA电泳分离检测。毛细管列阵是并行毛细管电泳的基础,根据毛细管列阵的毛细管数量分为96和12通道,每个毛细管首先注入可导电的分离胶,然后对毛细管两端施加电场,96孔板中的预检测样品开始毛细管电泳。依据核酸片段长度不同在凝胶电泳中迁移速度不同的原理核酸样品被分离检测。当毛细管中核酸片段通过位于LED和CCD探测器组件之间的检测窗口时被实时检测。核酸检测组件是由一个LED光源(470纳米激发)、照相机镜头和CCD探测器组成的光学平台。LED光源(470纳米激发)激发核酸样品中的嵌入染料产生荧光信号,然后通过相机镜头和特定的滤光器立体成像到CCD检测器,把实时荧光信号转换为实时电信号被软件实时读取,由此测绘每个样品完整的核酸片段分布峰图。
  毛细管电泳是一种在空芯的、极微小内径的毛细管中进行的液-液相大、小分子的蛋白分离技术。
  毛细管两端分别浸入缓冲液中,而缓冲液中分别插入连有高压电源的电极,根据被分离物之间电荷和体积的不同,带电荷分子朝相反极性的电极方向移动。又利用毛细管内壁上的电荷和应用的势能而引起的电解质移动,毛细管内表面带有硅羟基基团,当毛细管内充满缓冲溶液时,毛细管壁上的硅羟基发生解离,生成氢离子溶解在溶液中,这样就使毛细管壁上形成双电层,管壁是负电荷层,溶液是正电荷层。
  在毛细管的两端加上直流电场后,带正电的溶液就会整体向负移动,形成了电渗流。无论是带正电、带负电或不带电的粒子,都在电渗流的作用下,向阴极迁移,带正电的,受到同方向的电场力作用,迁移快,不带电的迁移速度次之,带负电的迁移速度慢,(因为它受到与电渗流反方向的电场力作用),从而实现各蛋白组分的分离。
  毛细管电泳仪的优势
  1、毛细管电泳仪的自动进样系统*实现全自动原始管上样,操作人员只需将带有条形码的原始管放在仪器试管架上,初始操作完毕后即可离开,毛细管电泳仪将自动连续运行样品,无须人为干预。样本经仪器自动稀释后,由高精气压控制的纳升级样品进样系统将样品地吸入毛细管内部。
  2、样品温控系统该高速电泳分离系统整合了一个高精度Peltier自动温控装置,能够对毛细管中产生的焦耳热进行实时稳定的控制,是保证毛细管电泳仪有效分离的关键,使实验重复性达到应用要求。
  3、毛细管电泳仪可以进行多种临床项目的检测。
  4、毛细管电泳仪检测结果*数据化、信息化管理利用互联网技术,实现各项检测结果的传输,包括曲线,工作流程和结果报告,并可建立实验室内部网络资库。
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